植物细胞的渗透势测定

一 实验目的

学会用质壁分离法测量植物细胞水势。 二 器材与试剂

1 实验仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、移液管(10ml)，培养皿 2 实验试剂：蔗糖溶液(1mol/L) 3 实验材料：洋葱 三 实验原理

植物细胞是一个渗透系统，若将植物细胞放在各种不同浓度的蔗糖溶液中时，由于细胞液的浓度与外界溶液的浓度(或水势)的差异。两者便会发生水分的交换。当细胞液的浓度高于外溶液的浓度(或者说ψs cell<ψs sol即 ψw cell < ψw sol)时，细胞则吸水，使细胞处于紧张状态;当细胞液的浓度低于外溶液的浓度时，(或者说ψs cell>ψs sol即ψw cell>ψw sol)时，细胞液中的水分则往外渗透，严重时则引起质壁分离;当细胞液的浓度与外界溶液的浓度相等时，(或者说 ψs cell= ψs sol 即ψw cell=ψw sol).细胞内外水分交换处于动态平衡。此时细胞既不紧张也不引起质壁分离，这时外溶液的浓度即为等渗浓度(即细胞内外ψs或ψw相等的浓度)。本实验是以细胞的初始质壁分离(即一视野中有半数细胞产生初始质壁分离)确定为等渗浓度。根据公式，即可计算出外溶液的ψs ，即ψs= - CiRT[i:离解系数，蔗糖等于1;c:等渗浓度;R：气体常数，0.0083 MPa·L/mol·K;T表示绝对温度，即273+t(实验时溶液的温度)]。因为 ψs sol=ψw sol,又因为细胞初始质壁分离时，ψp cell=0,即 ψw cell= ψs cell,所以 ψw cell(或ψs cell)= ψw sol( 或ψs sol). 四 方法步骤

1.按十字交叉法把1mol/L蔗糖溶液(母液)分别配成0.1、0.2、0.3、0.5、0.6 mol/L蔗糖溶液各10ml。置于培养皿中，摇匀加盖。

2.撕取带有色素的植物组织(如花瓣、洋葱鳞片等)表皮，分别投入各种浓度的蔗糖液中，(每浓度约放5片)，使其完全浸入。

3.20分钟之后依次取出表皮放在载玻片上，滴上同样浓度的溶液1滴，盖上盖玻片，在显微镜下观察细胞产生质壁分离的情况，确定等渗浓度C。

4.测量液温

5.根据公式ψs=-CiRT,计算出所测材料的ψw (ψs).

五 实验报告

试比较洋葱和大红花花瓣水势的高低。